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培養(yǎng)細胞時，由于培養(yǎng)的環(huán)境各不相同，同時細胞各階段的形態(tài)也存在一定差異，沒有一個確定的參照物去比對，很多老師同學也無法確定自己所養(yǎng)細胞的狀態(tài)是否正常。
那么如何判斷細胞狀態(tài)是正常還是異常呢？本期細胞學堂將詳介紹幾種常用的判斷方法，學會這幾招，輕松辨別細胞狀態(tài)！
01 如何判斷細胞活率
臺盼藍是細胞活性染料，常用于檢測細胞膜的完整性，可以檢測出細胞是否存活。正常的活細胞，胞膜結(jié)構(gòu)完整，能夠排斥臺盼藍，使之不能夠進入胞內(nèi)；而喪失活性或細胞膜不完整的細胞，胞膜的通透性增加，可被臺盼藍染成藍色。
通常認為細胞膜完整性喪失，即可認為細胞已經(jīng)死亡。活細胞不著色，而死細胞會被染成藍色。
(無色為活細胞，藍色為死細胞)
染色時間不能太長，3分鐘內(nèi)觀察，超時后活細胞也會逐漸積累染料而染成顏色，使檢測結(jié)果出現(xiàn)偏差。
在顯微鏡下觀察細胞形態(tài)：
懸浮細胞
活細胞透亮有光澤，死細胞暗淡無光且膜碎裂；
貼壁細胞
活細胞可貼壁且膜完整，死細胞不能貼壁。
（紅色圈為死細胞；綠色圈為活細胞；箭頭為血清雜質(zhì)）
細胞膜作為判斷細胞活性的標準之一，有的老師用“邊界清晰"來界定，認為邊界不清晰則是細胞狀態(tài)變差，實際情況我們也有發(fā)現(xiàn)部分細胞膜邊緣很薄再加上顯微鏡不清晰導致誤判，所以小普認為膜邊界是否清晰并不是金標準，我們更傾向于以細胞膜完整性作為判斷標準，“膜完整"則為活細胞。
（該細胞膜邊緣薄透，若為黃光顯微鏡可能看不清）
02 如何判斷細胞形態(tài)異常
1
你的細胞應(yīng)該長成什么樣?
在懷疑細胞形態(tài)改變之前，我們首先得知道一個正常的細胞應(yīng)該是什么樣的，誠如每顆多肉都會有其獨-特的色彩和習性，細胞也有其獨-特的習性，包括生長速度、形態(tài)、培養(yǎng)環(huán)境等；
2
從哪幾個方面判定細胞形態(tài)異常？
細胞的微環(huán)境會導致細胞形態(tài)改變，例如血清直接影響細胞的形態(tài)：
HK-2細胞顯微圖（無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)）
HK-2細胞顯微圖（MEM +10%FBS培養(yǎng)）
是否所有的形態(tài)改變都可以被定義為異常呢？答案是否定的。從上述例子中可以看出，兩種培養(yǎng)環(huán)境下細胞形態(tài)不同，但狀態(tài)都并無異常，因此我們需要視不同情況、綜合細胞增長速度進行評判：
未更換培養(yǎng)體系時
在培養(yǎng)體系沒有更換的前提下，細胞碎裂增多，黑點增多、形態(tài)改變、生長速度變慢，則應(yīng)考慮外源刺激物導致，可能已被污染，需排查污染源，并做針對性的預(yù)防措施。
更換了培養(yǎng)體系時
1
如果是因為更換了培養(yǎng)體系后導致的細胞形態(tài)改變，在細胞生長速度正常的情況下，可正常培養(yǎng)；
2
如果細胞更換培養(yǎng)條件后，嚴重變形甚至貼壁減少且不能正常傳代，必須進行干預(yù)，可通過包被培養(yǎng)瓶促進貼壁、增加血清濃度、與原培養(yǎng)基混合使用讓細胞過渡適應(yīng)等方式進行改善；
3
如果細胞對于新環(huán)境反應(yīng)激烈，直接死亡，則需更換培養(yǎng)體系；
03 如何判斷細胞污染
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